羊抗(kang)鼠IgG是免疫檢測領(ling)域(yu)的(de)“關(guan)鍵(jian)連接器”,作(zuo)為壹(yi)種異源(yuan)多克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti),它以(yi)鼠源(yuan)IgG為(wei)特(te)異性(xing)靶(ba)點(dian),在(zai)ELISA、免疫印(yin)跡(ji)、免(mian)疫組化等(deng)技(ji)術(shu)中(zhong)搭(da)建(jian)起“檢測分子(zi)-目標(biao)抗(kang)體(ti)”的(de)核(he)心(xin)橋梁(liang)。其(qi)“免(mian)疫橋梁(liang)”的(de)核(he)心(xin)價值(zhi)在(zai)於放大檢測信(xin)號、拓展(zhan)檢測維度(du),解(jie)決了直接檢測鼠源(yuan)抗(kang)體(ti)時(shi)靈(ling)敏度不(bu)足、標(biao)記困難的(de)問(wen)題,成為生物(wu)醫(yi)學研究(jiu)與(yu)臨床診斷(duan)中(zhong)不(bu)可(ke)少的(de)工(gong)具(ju)。
第壹(yi)重橋梁(liang)作(zuo)用:信(xin)號放大,突破(po)檢測靈(ling)敏(min)度瓶(ping)頸。在(zai)ELISA檢測(如四環(huan)素(su)殘(can)留檢測)中(zhong),鼠源(yuan)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體(ti)通(tong)常(chang)作(zuo)為壹(yi)抗(kang)與(yu)目標(biao)抗(kang)原結合(he),而羊抗(kang)鼠IgG作(zuo)為二(er)抗(kang)發揮(hui)信(xin)號放大作(zuo)用。羊抗(kang)鼠IgG可(ke)通(tong)過化(hua)學修飾偶聯辣(la)根過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(HRP)、堿性(xing)磷(lin)酸(suan)酶(ALP)等(deng)酶分子(zi),或熒(ying)光(guang)素(su)、量子(zi)點(dian)等(deng)標(biao)記物(wu)。由(you)於壹個鼠源(yuan)壹(yi)抗(kang)分子(zi)可被(bei)多個羊抗(kang)鼠IgG分子(zi)識(shi)別(bie)結合(he),形成“抗(kang)原-壹抗(kang)-二(er)抗(kang)-標(biao)記物(wu)”的(de)多(duo)級(ji)信(xin)號放大結構(gou),使檢測信(xin)號強度提升(sheng)10-100倍,將目標(biao)物質的(de)檢出(chu)限從(cong)μg級(ji)降(jiang)至ng甚(shen)至(zhi)pg級(ji),例(li)如在(zai)腫瘤標(biao)誌物(wu)檢測中(zhong),可(ke)實現早(zao)期微量抗(kang)原的(de)精(jing)準捕捉(zhuo)。
第二(er)重橋梁(liang)作(zuo)用:特(te)異性(xing)錨(mao)定(ding),確保(bao)檢測精(jing)準性(xing)。羊抗(kang)鼠IgG的(de)“橋梁(liang)”並非泛(fan)泛(fan)連接,而是基於嚴格(ge)的(de)抗(kang)原識(shi)別(bie)特(te)異性(xing)。其(qi)抗(kang)原結合(he)位(wei)點(dian)可精(jing)準識(shi)別(bie)鼠源(yuan)IgG的(de)Fc段(duan)(恒(heng)定(ding)區),該區域(yu)在(zai)不(bu)同(tong)鼠源(yuan)抗(kang)體(ti)中(zhong)高(gao)度(du)保(bao)守,不(bu)會(hui)與(yu)壹抗(kang)的(de)抗(kang)原結合(he)位(wei)點(dian)(Fab段)沖(chong)突,既(ji)保(bao)證了與(yu)壹抗(kang)的(de)穩(wen)定(ding)結合(he),又(you)不(bu)幹(gan)擾壹抗(kang)與(yu)目標(biao)抗(kang)原的(de)特(te)異性(xing)反(fan)應。這(zhe)種(zhong)“靶向結合(he)”特(te)性(xing)可(ke)有(you)效避免與(yu)樣品中(zhong)其(qi)他(ta)雜(za)蛋白的(de)非特異性(xing)結合(he),使免(mian)疫檢測的(de)特(te)異性(xing)提升(sheng)至(zhi)95%以上,減少假(jia)陽(yang)性(xing)結果(guo)的(de)出(chu)現。

第三(san)重橋梁(liang)作(zuo)用:技(ji)術(shu)適配(pei),拓(tuo)展(zhan)免疫檢測場景。
羊抗(kang)鼠IgG的(de)“橋梁(liang)”功(gong)能可(ke)靈(ling)活適(shi)配(pei)多種(zhong)檢測技(ji)術(shu),成為不(bu)同(tong)免疫方(fang)法(fa)的(de)通(tong)用(yong)連接器。在(zai)免疫印(yin)跡(ji)(Western Blot)中(zhong),它可(ke)偶聯熒(ying)光標(biao)記物(wu),通(tong)過成像系統捕捉(zhuo)目(mu)標(biao)蛋白條(tiao)帶;在(zai)免疫組化中(zhong),它與(yu)酶標(biao)分子(zi)結合(he)後(hou),通(tong)過底(di)物(wu)顯色實現組(zu)織中(zhong)目(mu)標(biao)抗(kang)原的(de)定(ding)位(wei)與(yu)定量;在(zai)流式(shi)細(xi)胞(bao)術(shu)中(zhong),熒(ying)光(guang)標(biao)記的(de)羊抗(kang)鼠IgG可(ke)識(shi)別(bie)結合(he)細(xi)胞(bao)表(biao)面的(de)鼠源(yuan)壹(yi)抗(kang),實現細(xi)胞(bao)亞群(qun)的(de)精(jing)準分選(xuan)。此(ci)外,在(zai)免疫沈澱實驗中(zhong),它還可作(zuo)為“捕獲分子(zi)”,與(yu)磁珠結合(he)後(hou)富(fu)集目標(biao)抗(kang)原-壹抗(kang)復(fu)合(he)物(wu),助(zhu)力(li)蛋(dan)白相(xiang)互作(zuo)用研究(jiu)。
“免疫橋梁(liang)”作(zuo)用的(de)發(fa)揮(hui),依(yi)賴羊抗(kang)鼠IgG的(de)高(gao)質量特性(xing)。優(you)質羊抗(kang)鼠IgG需(xu)具(ju)備高(gao)親(qin)和力(li)(解(jie)離常(chang)數(shu)KD≤10⁻⁹mol/L)、低(di)交叉(cha)反(fan)應(與(yu)兔、人等(deng)其他物(wu)種(zhong)IgG交叉(cha)反(fan)應率(lv)<1%)及(ji)良好的(de)穩(wen)定(ding)性(xing)。生產(chan)過程(cheng)中(zhong),通(tong)過對(dui)羊進(jin)行標(biao)準化免(mian)疫、親和層(ceng)析(xi)純化等(deng)工藝(yi),可去除雜(za)抗(kang)體(ti),提升(sheng)其(qi)特異性(xing)與(yu)純度。在(zai)實際應用中(zhong),需(xu)根據檢測技(ji)術(shu)選擇合(he)適(shi)標(biao)記的(de)羊抗(kang)鼠IgG,例(li)如ELISA常(chang)用HRP標(biao)記,熒(ying)光(guang)成像則優(you)先(xian)選用Alexa Fluor系列熒光(guang)標(biao)記產(chan)品。
在(zai)具(ju)體(ti)場景中(zhong),羊抗(kang)鼠IgG的(de)“橋梁(liang)”價值(zhi)尤(you)為凸(tu)顯:在(zai)臨床新冠抗(kang)體(ti)檢測中(zhong),它連接鼠源(yuan)抗(kang)新冠病毒壹(yi)抗(kang)與(yu)酶標(biao)系統,實現抗(kang)體(ti)的(de)快速篩(shai)查(zha);在(zai)食(shi)品過敏(min)原檢測中(zhong),通(tong)過信(xin)號放大作(zuo)用,精(jing)準檢出(chu)微量的(de)牛(niu)奶(nai)、花(hua)生過敏(min)原;在(zai)基礎(chu)科(ke)研中(zhong),助(zhu)力(li)蛋(dan)白質表(biao)達(da)定(ding)位(wei)、相(xiang)互作(zuo)用等(deng)核心(xin)問(wen)題的(de)解(jie)決。正(zheng)是這(zhe)種(zhong)“承上啟(qi)下(xia)”的(de)橋梁(liang)功(gong)能,讓(rang)羊抗(kang)鼠IgG成為免(mian)疫檢測技(ji)術(shu)體(ti)系的(de)核(he)心(xin)支撐(cheng),推動(dong)生物(wu)檢測向更(geng)靈敏、更(geng)精(jing)準的(de)方(fang)向發(fa)展(zhan)。